Alyssa Jayne Milano (New York, 19 december 1972) is een Amerikaans actrice, zangeres en fotografe.
Milano werd geboren als dochter van Thomas "Tom" Milano, een montageman die zorgt voor de muziek in een film, en Lin Milano, een voormalig modeontwerpster en talentenmanager. Milano besloot al op driejarige leeftijd, nadat ze verschillende films op de televisie had gezien, dat ze actrice wilde worden. Milano groeide op in haar geboorteplaats New York. Haar carrière ging uiteindelijk van start op achtjarige leeftijd, toen ze tijdens een open auditie de rol van weeskind June in de Broadway-musical Annie won. Na een looptijd van 18 maanden werd ze vervangen door een jongere actrice en kreeg ze de rol van Adel in de musical Jane Eyre. Nadat haar tijd bij die musical voorbij was, verscheen ze in John O'Keefe's All Night Long in de Manhattan's Second Stage Theatre.
Nadat ze in 1983 een kleine rol had gespeeld in de kleine film Old Enough, waarin ze de zus van de hoofdpersoon uitbeeldde, deed ze auditie voor verscheidene pilots om een carrière in de televisiewereld te beginnen. Toen ze auditie deed voor de rol van Samantha Micelli in Who's the Boss?, had ze het script nog niet gelezen. Desondanks kreeg ze de rol van de tomboy. Voor haar rol moest ze met een Brooklyns accent praten. Ze was hiermee opgegroeid, maar onderdrukte dit accent toen ze het theater in ging. De actrice gaf toe dat ze veel problemen had met het terugkrijgen van dit accent. Who's the Boss werd pas een seizoen later opgepakt door ABC en werd na de première op 20 september 1984 een groot succes.