Rachael Ann MacFarlane (Kent, 21 marzo 1976) è una doppiatrice e cantante statunitense, meglio nota per aver prestato la voce al personaggio di Hayley Smith della serie animata American Dad!, creata da suo fratello maggiore Seth.
Rachael MacFarlane nasce a Kent, nel Connecticut, da Ronald Milton MacFarlane (1946) e Ann Perry Sager (1947-2010), rispettivamente insegnante presso la scuola pre-universitaria Kent School e impiegata, entrambi originari di Newburyport, nel Massachusetts. Ha un fratello, Seth, doppiatore, regista e animatore. Frequenta la Boston Conservatory per qualche tempo, prima di ritirarsi a Los Angeles per intraprendere la sua futura carriera di doppiatrice.
MacFarlane cominciò a doppiare alcuni personaggi delle serie Hanna-Barbera e in altre serie animate quali Johnny Bravo e Il laboratorio di Dexter. Inoltre ha lavorato anche nei film TV di Le tenebrose avventure di Billy e Mandy. In seguito, suo fratello Seth le chiede di aiutarlo in una nuova serie animata da lui creata per la Fox, che diventerà nota con il nome di I Griffin. Rachael lavorò nella serie, doppiando alcuni personaggi minori e questo la porterà verso il lancio della sua carriera come doppiatrice. Dal 2005 entra a far parte del cast della nuova serie animata (creata sempre dal fratello) American Dad!, dove doppia il personaggio di Hayley Smith.