Jo Ann Pflug auch JoAnn Pflug (* 2. Mai 1940 in Atlanta, Georgia) ist eine US-amerikanische Schauspielerin in Film und Fernsehen. Sie spielte Rollen in Filmen wie M.A.S.H., Catlow – Leben ums Verrecken, Wo tut's weh? oder Mitternacht im Garten von Gut und Böse.
Jo Ann Pflug wurde 1940 in Atlanta im Bundesstaat Georgia geboren. Ihr Vater, J. Lynn Pflug, wurde 1958 zum Bürgermeister von Winter Park gewählt. Im selben Jahr absolvierte Jo Ann Pflug die Winter Park High School in Winter Park, Florida, in der Nähe von Orlando. Danach studierte sie an der University of Miami in Coral Gables in Florida. 1966 startete sie ihre Film- und Fernsehkarriere.
Pflugs erste große Kinorolle spielte sie 1970 in Robert Altmans erfolgreicher Militärsatire M.A.S.H. als US Army Krankenschwester Lt Maria "Dish" Schneider. Weitere Rollen auf der Leinwand hatte sie 1971 in dem humorvollen Western von Regisseur Sam Wanamaker in Catlow – Leben ums Verrecken an der Seite von Yul Brynner, Richard Crenna und Daliah Lavi und 1972 als Partnerin von Peter Sellers in Rod Amateaus Komödie Wo tut's weh?. Ende der 1990er Jahre sah man sie nochmals in Nebenrollen in Jack N. Greens Kriminalfilm Traveller - Die Highway Zocker mit Bill Paxton, Mark Wahlberg und Julianna Margulies und in Clint Eastwoods Drama Mitternacht im Garten von Gut und Böse.